雞甲狀腺素(T4)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書 本試劑盒僅供研究使用。
檢測范圍：96T
3µg/L - 80µg/L
使用目的：
本試劑盒用于測定雞血清、血漿及相關(guān)液體樣本中甲狀腺素(T4)含量。
實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中雞甲狀腺素(T4)。用純化的雞甲狀腺素(T4)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入甲狀腺素 (T4)，再與 HRP標記的甲狀腺素 (T4)抗體 ，形成抗體 -抗原-酶標抗體復合物。TMB 在 HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的。顏色的深淺和樣品中的甲狀腺素(T4)呈正相關(guān)。用酶標儀在 450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中雞甲狀腺素(T4)濃度。 試劑盒組成
標本要 1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融 2．不能檢測含NaN3的樣品，因 NaN3抑制辣根過（HRP）活性。
雞甲狀腺素(T4)酶聯(lián)免疫分析試劑盒操作步驟 1. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。 2.加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、1待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣 50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl，然后再加待測樣品 10μl（樣品終稀釋度為 5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。 3.溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育30分鐘。
4.配液：將 30倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30倍稀釋后備用。
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30秒后棄去，如此重復 5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標試劑 50μl，空白孔除外。
7.溫育：操作同 3。
8.洗滌：操作同 5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl，再加入顯色劑 B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘。
10.終止：每孔加終止液 50μl，終止反應（此時藍色立轉(zhuǎn)）。
11.測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。測定應在加終止液后 15分鐘以內(nèi)進行。
操作程序總：
計算 以標準物的濃度為橫坐標， OD值為縱坐標，在坐標紙上，根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與 OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的 OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。
雞甲狀腺素(T4)酶聯(lián)免疫分析試劑盒注意事項 1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡 15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未 用完，板條應裝入密封袋中保存。 2．濃洗滌液可能會有 析出，稀釋時可在浴中加溫助溶，洗滌時不影響。 3．各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間好控制在 5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。 4．請每次測定的同時做標準曲線，好做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本 OD值大于標準品孔孔的 OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。 5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉。 6．底物請避光保存。 7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗.
8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。 9．本試劑不同批號組分不得混用。
保存條件及有效期 1．試劑盒保存：2-8℃。 2．有效期：6個月 | 
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